基因工程是指在微观领 域（分子水平）中，根 据分子生物学和遗传学 原理，设计并实施一项 把一个生物体中有用的 目的 DNA( 遗传信息 ) 转 入另一个生物体中，使 后者获得新的需要的遗 传性状或表达所需要的 产物，最终实现该技术 的商业价值。
动物疫苗、生长激素等 例：从转基因羊的羊奶 中提取出治疗心脏病的 药物tPA
用携带外源基因的农杆菌Ti质粒转化植物原生质体， 使外源DNA与植物染色体DNA整合，通过原生质 体的培养分化成愈伤组织，最后发育成具有新性状 的完整植株—转基因植物
基因工程、细胞工程、发酵工程、蛋白质（酶）工程 此外还有基因诊断与基因治疗技术、克隆动物技术、
生物芯片技术、生物材料技术、生物能源技术、利用 生物降解环境中有毒有害化合物的技术
直接相关联的学科：分子生物学、微生物学、生物化 m6米乐官网 米乐M6平台入口学、遗传学、细胞生物学、化学工程学、医药学等。 对人类和社会生活各方面影响最大的生物技术领域： 农业生物技术、医药生物技术、环境生物技术、海洋 生物技术
• 根据其来源命名。如： 属名 菌株名 E co R I 种名 编号 • 第一个字母（大写、斜体） 该酶的微生物属名 第二、三个字母（小写、斜体） 代表微生物种名 第四个字母（斜体） 代表寄主菌的株或型 用罗马数码I、II、III等区分同一株具 有不同特异性的酶
• 目的基因（靶基因）的制 备 • 载体的选择与制备 • 目的基因与载体的连接 • 将重组DNA分子转入宿 主细胞，并在其中进行复 制、扩增 • 重组子的筛选与鉴定 • 表达产物的鉴定 • 工程菌（细胞）的大规模 培养 • 表达产物的分离与纯化
1940年，Florey和Chain等提取获得青霉素，并临床证明了其疗效好和毒性 低的特定； 1941年，美国和英国合作开发出生产效率高、产品质量好、通入无菌空气 进行搅拌发酵的培养方法生产技术，大大提高了青霉素的生产效率，并为 生物技术的发酵工业带来革命性的变化；
以后，链霉素、金霉素和红霉素等相继问世，氨基酸发酵和酶制剂工业也 得到发展； 这个时期医药业主要生产抗生素、维生素、甾体激素和氨基酸。
作用：去除DNA、RNA、NTP和dNTP的5` 磷酸根。 在基因克隆时可去除载体DNA片段的 5`－P.以防载体自身环化
1982年，美国食品与药物管理局批准了首例 基因工程产品 — 人胰岛素投放市场 —— 它标 志了基因工程产品正式进入到商业化阶段。 人生长激素、表皮生长因子、肿瘤坏死因子、 a- 米乐M6 米乐平台干扰素、纤维素酶、抗血友病因子、红细 胞生成素、尿激酶原、白细胞介素 -2 、集落 刺激因子、乙肝疫苗等等
• 一般限制性内切酶的最适反应温度为37℃，但也 有例外，如Sma Ⅰ则为25 ℃。此外不同的限制 性内切酶反应所需的离子强度也不一样，一般分 高、中、低三种，在进行操作时可按供应商所提 供的反应体系与反应温度进行。
• 纯化后的限制性内切酶一般储存在含有50％甘油 的缓冲液中，保存在-20℃，不会冰冻，一般可储 存一年以上。若低于-20℃可使50％甘油冰冻，反 复冻融会导致酶严重失活
DNA双螺旋 全部遗传密 DNA重组技 结构发现 码的破译 术的建立 Genentech公司 单克隆抗体 第一个人的基 第一个单克隆抗 获得重组人胰 技术的建立 因获得克隆 体诊断试剂盒在 岛素生产许可 美国批准使用
应用：DNA分子的体外合成、定点突变、 DNA探针的标记、DNA序列测定、基因文 库的构建、聚合酶链反应（PCR）等等
（2）T4多核苷酸激酶 催化ATP的γ－磷酸集团转移到DNA或 RNA的5`-OH 上。 用途：化学合成的寡核苷酸片段的5`-OH上 加上磷酸集团，以便进行化学合成基因的 拼连
一、传统生物技术阶段：主要以酿酒和制醋为主 1. 早在公元前5000年，就出现了酿酒和制醋的生产技术； 2. 1680年发明了显微镜，才知道自然界有微生物存在； 3. 1857年，用实验方法证明酒精发酵是活酵母所引起的结果； 4. 1897年，发现磨碎的死酵母仍能使糖发酵成酒精，并将其中的活性物质称 为“酶”。 二、近代生物技术阶段：主要以微生物发酵为基础 1. 1928年，英国的Fleming发现青霉素；
• ①转基因鱼逃逸或释放到外界环境后，与野生物 种进行交配，而导致外米乐M6 米乐平台源基因的扩散，改变物种 原有的基因组成，造成种质资源的混乱； • ②转基因个体经人工定向改造，往往抗逆、抗病 性强，对环境具有更强的适应性和竞争力，一旦 释放到自然环境，可能破坏到原有的种群生态平 衡，威胁物种的遗传多样性； • ③由于转基因整合的随机性，所转移的基因很可 能被整合到含有非常重要基因所往区域内，而引 起插入突变。如果产生的突变基因在发育过程中 十分重要，将有可能引起遗传缺陷而产生先天性 疾病，甚至此亡。
• 在分子水平上按照人们设计方案将DNA片 段（目的基因）插入载体DNA分子（如质 粒、病毒等），从而实现DNA分子体外重 组，产生新的自然界从未有过的重组DNA 分子，然后再将之引入特定的宿主细胞进 行扩增和表达，使宿主细胞获得新的遗传 性状的技术。有时也称为Recombinant DNA technology.
克隆羊多 人类基因组 人类基因组 草图完成 30亿碱基对 莉诞生 测序完成